操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)
结肠炎诱导 [1]
1. 准备流程
敏化液的配制(一):
通过涡旋以 4:1 v/v 比例混合丙酮和橄榄油。 将 60 mg Oxazolone 粉末溶解在 2 mL 该溶液中,得到 3% (w/v) Oxazolone 敏化溶液。 小心涡旋混合溶液。
挑战液的制备(二):
将 20 mg Oxazolone 溶解在 2 mL 50% 乙醇中,得到 1% (w/v) 溶液。 小心涡旋混合溶液。 使用前应将 Oxazolone 粉末完全溶解。
2. 实验流程
敏化预处理:
电剪刀在小鼠背部皮肤上刮去约 2 cm x 2 cm 的面积。 小心避免开放性伤口。
将 150 μL Oxazolone 致敏液 (I) 涂于小鼠裸露皮肤上。 请注意使用不含 Oxazolone 的敏化剂作为对照。 诱导处理:
腹腔注射氯胺酮/噻嗪溶液 (80 μL/10 g),或用异氟烷麻醉系统吸入麻醉小鼠。
将导管插入小鼠的结肠 (肛门近端约 3-4 cm 深)。 导管的另一端连接至 1 mL 注射器。
将约 100 μL Oxazolone 刺激液 (II) 通过导管注入结肠腔 10 至 30 秒。 给药后,将鼠标保持垂直位置 (头朝下) 60 秒。