思科捷ECL发光液上新啦！
特超敏pg级灵敏度，让检测蛋白在膜上无处遁形

免疫组化是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。

蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称，主要作用是催化蛋白质水解。

按其水解多肽的方式，可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶作用于蛋白质多肽链的内部，可以在特定肽键处切割，产生多个较小的肽段；外肽酶则作用于蛋白质或多肽链的末端，逐个将肽键水解，释放出单个的氨基酸。按其作用活性中心，又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶等。

为了保护蛋白，降低蛋白降解的风险，在实验中抑制蛋白酶的活性便是首要的任务，因此蛋白酶抑制剂身担重任。

CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 的有效成分是 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐) ，是一种类似于 MTT (Thiazolyl Blue) 的化合物，它在电子耦合试剂 1-Methoxy PMS 存在条件下，可被线粒体内的脱氢酶还原为甲瓒产物 Formazan (橙色，具有高度水溶性) ，而生成的 Formazan 数量与活细胞数量成正比。

RNA是反转录的模板，在提取到浓度和纯度合适的RNA后，接下来便是进行RNA反转录。通常RT-PCR等实验前需要先用DNase I消化去除RNA中残留的基因组DNA（gDNA），但是传统DNase I处理过程复杂并容易造成RNA的降解和损失。另外，RNA反转录酶可能具有不同的性质和功能活性，这会影响其反转录长链RNA、高GC含量RNA、具有复杂二级结构的RNA和不纯RNA的能力。所以，现实中有时候会出现RNA反转录实验重复了好几次，但很玄学的就是不按照原计划出结果......

CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 的有效成分是 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐) ，是一种类似于 MTT (Thiazolyl Blue) 的化合物，它在电子耦合试剂 1-Methoxy PMS 存在条件下，可被线粒体内的脱氢酶还原为橙色甲瓒产物 Formazan (具有高度水溶性) ，而生成的 Formazan 数量与活细胞数量成正比。

✍单一成分蛋白酶抑制剂：

      例如大家最熟悉的 PMSF (苯甲基磺酰氟化物) ，它是一种不可逆的抑制剂，专门针对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。PMSF 具有一定的毒性，且在水溶液中的半衰期为 30 min，在细胞裂解过程中很容易失效。

✍复合型蛋白酶抑制剂 (cocktail) ：

      这类抑制剂是由多种不同机制的抑制剂按照特定比例混合而成，可起到广泛的抑制效果，适应多样化的样本处理需求。

     根据成分是否包含 EDTA，复合型 cocktail 可细分为含 EDTA 和不含 EDTA 两种类型。EDTA 能够与金属离子(如 Ca²⁺，Mg²⁺，Ni²⁺等)形成螯合物，有效抑制依赖金属离子的蛋白酶活性。在需要维持金属离子活性的实验中，例如纯化 His 标签蛋白或进行 2D 电泳时，推荐使用不含 EDTA的蛋白酶抑制剂cocktail。

厌氧菌培养关键点在于严格厌氧！快速严格厌氧！

思科捷采用“Vacuum Pumping & Filling” 技术可实现快速严格厌氧，最快仅需1min即可达成氧气浓度低于百万分之五！微需氧环境20秒即可达成！因其优异的算法以及精准的气体控制使得厌氧模式6皿仅需3L混合气体，微需氧仅需1L！远远低于工作站的耗气量。

PCR（polymerase chain reaction）技术称聚合酶链式反应技术，又称无细胞克隆技术，是一种在体外通过DNA聚合酶（如Taq DNA聚合酶）扩增特定DNA片段的技术，其‌主要依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，‌其原理类似于DNA的天然复制过程。‌该技术由变性-‌退火-延伸三个基本反应步骤构成：‌

DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA在高温的作用下氢键断裂，形成单链DNA，‌以便与引物结合。

退火（50-60℃）：‌温度降低，‌引物与模板DNA单链的互补序列配对结合，形成局部双链。‌

延伸（70-75℃）：DNA模板-引物在DNA聚合酶（如Taq DNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，从引物的5’端至3’端延伸，合成与模板互补的DNA链。