思科捷仪器如同十月怀胎孕育的婴孩，在2024年3月秉承着“思以科，捷所成”的理念，围绕微生物培养和细胞培养两大实验室场景呱呱坠地，推向全国市场。

蛋白凝胶是蛋白检测中不可缺少的伙伴，但是……

“要疯啦！蛋白实验太费心神了！配个胶单组分那么多，TEMED还有毒！啥时候能有一款快速配制的蛋白凝胶呀！”

“生气！胶凝的太慢了，配完下层胶还得液封，上层胶和下层胶就不能一起配吗？”

“烦躁！电泳时间太久了，得长时间一直注意着分离情况，有时候一不留神，最佳分离效果的阶段就错过了，真想一个电压快速跑到底。”

2024年3季度，思科捷喜报频传，共有78个思科捷产品在新发表的文献中被引用。影响因子共计522.5。

合作单位有中国医学科学院生物医学工程研究所，山东农业大学，北京大学，吉林大学，同济大学，安徽大学，福建农林大学，中国海洋大学，康复大学，南开大学，长春中医药大学，山东中医药大学，南京农业大学，青岛农业大学，南京医科大学，烟台大学，南京林业大学，安徽中医药大学，南京医科大学和南通大学等。

 本篇推文，思科捷将对引用思科捷 (Spark Jade) 产品发表文章至Bioactive Materials，Nature Communications，Chemical Engineering Journal 期刊的3 篇 IF＞13 的文献进行简单介绍，和星博士一起来了解吧。

思科捷ECL发光液上新啦！
特超敏pg级灵敏度，让检测蛋白在膜上无处遁形

免疫组化是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。

蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称，主要作用是催化蛋白质水解。

按其水解多肽的方式，可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶作用于蛋白质多肽链的内部，可以在特定肽键处切割，产生多个较小的肽段；外肽酶则作用于蛋白质或多肽链的末端，逐个将肽键水解，释放出单个的氨基酸。按其作用活性中心，又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶等。

为了保护蛋白，降低蛋白降解的风险，在实验中抑制蛋白酶的活性便是首要的任务，因此蛋白酶抑制剂身担重任。

CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 的有效成分是 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐) ，是一种类似于 MTT (Thiazolyl Blue) 的化合物，它在电子耦合试剂 1-Methoxy PMS 存在条件下，可被线粒体内的脱氢酶还原为甲瓒产物 Formazan (橙色，具有高度水溶性) ，而生成的 Formazan 数量与活细胞数量成正比。

RNA是反转录的模板，在提取到浓度和纯度合适的RNA后，接下来便是进行RNA反转录。通常RT-PCR等实验前需要先用DNase I消化去除RNA中残留的基因组DNA（gDNA），但是传统DNase I处理过程复杂并容易造成RNA的降解和损失。另外，RNA反转录酶可能具有不同的性质和功能活性，这会影响其反转录长链RNA、高GC含量RNA、具有复杂二级结构的RNA和不纯RNA的能力。所以，现实中有时候会出现RNA反转录实验重复了好几次，但很玄学的就是不按照原计划出结果......

CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 的有效成分是 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐) ，是一种类似于 MTT (Thiazolyl Blue) 的化合物，它在电子耦合试剂 1-Methoxy PMS 存在条件下，可被线粒体内的脱氢酶还原为橙色甲瓒产物 Formazan (具有高度水溶性) ，而生成的 Formazan 数量与活细胞数量成正比。

✍单一成分蛋白酶抑制剂：

      例如大家最熟悉的 PMSF (苯甲基磺酰氟化物) ，它是一种不可逆的抑制剂，专门针对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。PMSF 具有一定的毒性，且在水溶液中的半衰期为 30 min，在细胞裂解过程中很容易失效。

✍复合型蛋白酶抑制剂 (cocktail) ：

      这类抑制剂是由多种不同机制的抑制剂按照特定比例混合而成，可起到广泛的抑制效果，适应多样化的样本处理需求。

     根据成分是否包含 EDTA，复合型 cocktail 可细分为含 EDTA 和不含 EDTA 两种类型。EDTA 能够与金属离子(如 Ca²⁺，Mg²⁺，Ni²⁺等)形成螯合物，有效抑制依赖金属离子的蛋白酶活性。在需要维持金属离子活性的实验中，例如纯化 His 标签蛋白或进行 2D 电泳时，推荐使用不含 EDTA的蛋白酶抑制剂cocktail。