操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)
Thioflavine S 染色方案
1. 组织切片的脱蜡和水合:将载玻片放置在固定器中,并用透明剂二甲苯 (石蜡溶剂) 和一系列分级的乙醇进行如下处理:
100% 二甲苯 - 5 分钟
100% 二甲苯 - 5 分钟
50%/50% 二甲苯/100% EtOH - 3 分钟
100% 乙醇 - 3 分钟
95% 乙醇 - 3 分钟
70% 乙醇 - 3 分钟
50% 乙醇 - 3 分钟
水 - 2 x 3 分钟
【注】:大约使用 5 次后,或者当您发现溶液没有从载玻片上完全流出时,表明载玻片中石蜡过多,请更换溶液。
2. 在过滤的 1% Thioflavine-S 水溶液中室温孵育 8 分钟 (每次使用前过滤 Thioflavine-S)。
【注】: Thioflavine-S 避光,染色后的玻片也尽可能避光。Thioflavine-S 染色剂应在 4℃ 保存。
3. 用 80% 乙醇洗涤 2x 3 分钟
4. 95% 乙醇洗涤 3 分钟
5. 用蒸馏水清洗 3 次
6. 盖玻片于水性封固剂中,并让载玻片在黑暗中干燥过夜。
7. 第二天,用透明指甲油密封盖玻片。
8. 在接下来的几天或几周内分析载玻片,因为染色会随着时间的推移而褪色。 将载玻片储存在 4℃ 的黑暗中。