Acridine Orange hydrochloride 是一种细胞膜渗透性的核酸结合染料,与双链 DNA (dsDNA) 结合发射绿色荧光,与单链 DNA (ssDNA) 或 RNA 结合发射橙红色荧光,这一独特的特征使其特别适用于细胞周期研究。Acridine Orange hydrochloride 还可用于各种细胞培养物和组织模型的凋亡研究。Acridine Orange hydrochloride 染料可用于染色细胞内酸性囊泡;测量溶酶体膜渗透性 (LMP) 或自噬检测。
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In solvent
建议分装储备液,避免反复冻融!
粉末避光保存,粉末溶成母液后也需避光保存。
Acridine Orange hydrochloride 是一种可穿透细胞的核酸选择性荧光染料,可以染色 ssDNA 、RNA 和酸性糖胺聚糖。在低浓度时,它嵌入 DNA 并沉淀 RNA。然而,在高浓度时,它使 RNA 和 DNA 变性并沉淀 [1]。
Acridine Orange hydrochloride 也用于分析自噬。以 pH 依赖性方式进入酸性细胞器。在中性 pH 条件下,Acridine Orange hydrochloride 发出绿色荧光,在酸性条件下,Acridine Orange hydrochloride 在酸性细胞器中聚集,发出明亮的橙红色荧光 [2]。
使用 40 只小鼠,Acridine Orange hydrochloride 经静脉注射一次。连续观察 14 天。实验结束后,所有动物被处死,以备后续研究。结果发现雄性和雌性小鼠 Acridine Orange hydrochloride 的 LD50 分别为 32 mg/kg 和 36 mg/kg。只有一只小鼠在给药 3 天后死亡,组织病理学异常。另外 9 只给药后立即死亡的小鼠主要器官未见病理变化 [3]。
Acridine Orange hydrochloride (0.1 mg/kg;静脉注射;狗) 在 30 天内没有表现出临床毒性迹象,血液中也没有发现异常 [4]。
操作指南 (以下是我们的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改) [5]
1. 用 Acridine Orange zinc chloride salt 染色细胞 (1 μM;20 分钟;37 ℃)。
2. 用 PBS 洗涤细胞。
3. 通过共聚焦激光扫描显微镜 (FV3000,Olympus) 观察细胞。
[1]. F.W.D.Rost. Fluorescence Microscopy (1992).
[2]. KunduS et al.Viriditoxin regulates apoptosis and autophagy via mitotic catastrophe and microtubule formation in human prostate cancer cells.Int J Oncol. 2014 Dec;45(6):2331-40.
[3]. Nakamura T, et al.Determination of the LD50 of acridine orange via intravenous administration in mice in preparation for clinical application to cancer therapy.In Vivo. 2014 Jul-Aug;28(4):523-7.
[4]. McMaster GK, et al. Analysis of single- and double-stranded nucleic acids on polyacrylamide and agarosegels by using glyoxal and acridine orange. Proc Natl Acad Sci U S A. 1977 Nov;74(11):4835-8.
[5]. Wang Q, et al. Substrate stiffness regulates the differentiation profile and functions of osteoclasts via cytoskeletal arrangement. Cell Prolif. 2022 Jan;55(1):e13172.
备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。
纯度: 99.31%
4:部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,注:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系SparkJade);
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL Corn oil,混匀澄清。
注意:1. 首先保证母液是澄清的; 2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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