TCEP hydrochloride 是一种非硫醇还原剂,能够以剂量相关的方式来促进 NF-κB-DNA 的结合。TCEP hydrochloride 比其他化学还原剂更稳定并且产生更快的 S-S 还原反应。TCEP hydrochloride 是一种三烷基膦,可选择性地减少蛋白质的分解,而不会改变其性质或与反应混合物中的硫醇导向剂发生相互作用。TCEP hydrochloride 还是 DNA/AuNP 化学中常用的还原剂。
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In solvent
建议分装储备液,避免反复冻融!
-20℃,粉末避光保存,粉末溶成母液后也需避光保存。
NF-κB [1]
采用重组 p50 蛋白和 32p 标记的 κB 寡核苷酸,TCEP hydrochloride 有望作为体外 NF-κB-DNA 结合反应中更常用的 DTT 的替代品。在结合反应中 DTT 促进 NF-κB-DNA 结合的浓度为 0.25-2.6 mM。然而,在 0.25 mM DTT 存在的情况下,只有在 Hg2+ 浓度大于 100 μM 时才能观察到 NF-κB 结合的抑制,且结果具有显著差异。相比之下 TCEP hydrochloride 可在 0.25-6 mM 浓度范围内以剂量相关的方式促进 NF-κB-DNA 结合。即使在 6 mM TCEP hydrochloride 存在的情况下,低至 20 μM 浓度的 Hg2+ 也能够阻止 NF-κB-DNA 结合反应 [1]。
将人乳铁蛋白 (hLF) 溶解于磷酸盐缓冲液中至浓度为 0.1 mM,在 37℃ 孵育 2 小时的条件下,可通过添加 30 倍摩尔过剩的 TCEP hydrochloride 还原二硫键 [2]。
[1]. Dieguez-Acuña FJ, et al. Inhibition of NF-kappaB-DNA binding by mercuric ion: utility of the non-thiol reductant, tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride (TCEP), on detection of impaired NF-kappaB-DNA binding by thiol-directed agents. Toxicol In Vitro. 2000 Feb;14(1):7-16.
[2]. Duchardt F, et al. A cell-penetrating peptide derived from human lactoferrin with conformation-dependent uptake efficiency. J Biol Chem. 2009 Dec 25;284(52):36099-108.
备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。
纯度: ≥98%
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计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,注:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系SparkJade);
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL Corn oil,混匀澄清。
注意:1. 首先保证母液是澄清的; 2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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