Thiazolyl Blue (MTT) 是一种具有细胞渗透性和正电荷的四唑染料,用于检测细胞的还原性代谢。Thiazolyl Blue 被细胞通过质膜吸收,然后被细胞内的 NAD(P)H 氧化还原酶还原为甲醛。Thiazolyl Blue 经常用于比色测定,以测量细胞增殖、细胞毒性和凋亡 [1]。
Thiazolyl Blue 法的原理:Thiazolyl Blue 是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。Thiazolyl Blue 检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 Thiazolyl Blue 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒 (Formazan) 并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜 (DMSO) 能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在 490 nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,Thiazolyl Blue 结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。Thiazolyl Blue 的特点是灵敏度高和经济。
Thiazolyl Blue 也可用作免疫组化/细胞化学染色试剂,也可用来检测 NAD。Thiazolyl Blue 被快速还原成甲臜后,能够螯合镍、铜和钴,钴螯合物可参与机体氧化系统。